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          技術文章/ARTICLES

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          土壤高速冷凍離心機在土壤DNA提取中的應用

          點擊次數:153  發布時間:2022-11-08
            使用土壤高速冷凍離心機的所有轉頭都具有轉頭自鎖功能,能夠輕松裝卸,同時所有轉頭都能夠高溫高壓滅菌,保障了使用者的安全性。
            
            土壤高速冷凍離心機具體提取土壤DNA的步驟:
            
            一、土壤樣本預處理:
            
            1、取500mg土壤樣本至研磨管中。
            
            2、加入980µL緩沖液,輕柔渦旋混勻。
            
            3、加入120μL裂解液。
            
            4、將研磨管置于研磨儀中,40Hz處理40sec。
            
            5、12000rpm離心5min,沉淀碎片顆粒。
            
            6、轉移上清液至2mL離心管中。加入250μL去蛋白液,手動搖晃混勻。4℃放置5min。
            
            7、12000rpm離心3min,之后取不多于900μL上清液,轉移至2mL離心管中。
            
            8、加入1/3體積的結合液,輕柔渦旋混勻。4℃放置5min。
            
            9、12000rpm室溫離心1min。轉移上清液至5mL離心管中。
            
            10、加入1.5倍體積的緩沖液,立即吹打混勻。
            
            二、DNA提?。?/div>
            
            1、將DNA吸附柱套入2mL收集管中,備用。
            
            2、將預處理混合液加入到DNA吸附柱中,12,000rpm室溫離心1min,棄掉廢液。
            
            3、將DNA吸附柱放回收集管,加入600µL漂洗液,12,000rpm室溫離心30sec,棄廢液。
            
            4、重復一遍步驟3。
            
            5、將DNA吸附柱放回收集管,空柱12,000rpm離心2min,以除去殘留的漂洗液。
            
            6、將DNA吸附柱放入新的潔凈1.5mL離心管中,在濾膜中央加入30-100µL洗脫液,室溫放置3min。然后12,000rpm離心1min,收集濾液即為樣本DNA。
            
            7、DNA樣品可置于-20℃短期保存,-80℃長期保存。
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